Microscopia Confocal

Curso Básico de Microscopia Confocal

(Máximo de 12 alunos)

Professora responsável: Grasiella Maria Ventura Matioszek

Público alvo: Professores e Alunos do Programa de Pós-Graduação em Anatomia Patológica

Objetivos:

1. Apresentar os princípios teóricos básicos da microscopia confocal.

2. Ensinar a utilização do microscópio confocal pelos alunos – “hands on.”

3. Demonstrar diferentes funções do microscópio confocal de varredura a laser: Time lapse + ressonante escaner,

    detecção espectral (Lambda Scanning), colocalização.

 Ementa:

• Magnificação x Resolução.

• Disco de Airy; Point Spread Function.

• Lasers; Filtros; Espelhos Dicroicos; AOBS.

• Fluorescência.

• Preparação da Amostra: Suporte; Fluoróforos; Anti-Fading, etc.

• Pinhole e Formação da Imagem no Microscópio Confocal por Escaneamento a Laser (LSCM).

• Aquisição da Imagem: Modos de Aquisição; Formato da Imagem; Escaneamento Sequencial; Line e Frame Average;

  Ajuste do Pinhole; Ganho e Offset.

• Resolução Óptica x Resolução Digital; Escolha da Objetiva e Aplicação do Teorema de Nyquist.

• Colocalização.

• Time Lapse.

• Lambda Scanning.

Cronograma:

Período: 6 a 10 de fevereiro de 2017, de 9h às 12 horas.

Carga horária: 20 horas

♦ 6/2/2017 -  2^a feira de manhã: Aula teórica

Magnificação x Resolução; Disco de Airy; PointSpread Function; Lasers; Filtros; Espelhos Dicroicos; AOBS; Preparação da Amostra: Suporte, Fluoróforos, Anti-Fading, etc.; Pinhole e Formação da Imagem no Microscópio Confocal por Escaneamento a Laser (LSCM).

♦ 7/2/2017 -  3^a feira de manhã: Aula teórico-prática

Aquisição da Imagem: Modos de aquisição; Formato da Imagem; Escaneamento Sequencial; Line e Frame Average, Ajuste do Pinhole, Ganho e Offset.

Aula prática - Dupla 1

♦ 8/2/2017 -  4^a feira de manhã: Aula teórico-prática

Resolução Óptica x Resolução Digital; Escolha da Objetiva e Aplicação do Teorema de Nyquist; Colocalização.

Aula prática - Dupla 2

♦ 9/2/2017 - 5^a feira de manhã: Aula teórico-prática

Time Lapse; Lambda Scanning

Aula prática - Dupla 3

♦ 10/2/2017 -  6^a feira de manhã:

Aula prática – Trio 1

Aula prática – Trio 2

Bibliografias:

• Alan R. Hibbs - Confocal Microscopy for Biologists. 1st ed., New York, Springer, 2004, 467 pages.

• Brian Matsumoto (Editor) - Methods in Cell Biology, Volume 70 - Cell Biological Applications of Confocal Microscopy,

   2nd ed., San Diego, Academic Press, 2002, 507 pages.

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